Sexually transmitted infections detected by multiplex real time PCR in asymptomatic women and association with cervical Intraepithelial neoplasia / Infecções sexualmente transmissíveis detectadas por PCR multiplex em tempo real em mulheres assintomáticas e associação com neoplasia intraepitelial cervical

Abstract Objective To determine the frequency of sexually transmitted infections (STIs) in asymptomatic women and the association of STIs with cervical intraepithelial neoplasia (CIN). Methods A cross-sectional studywas performed, enrollingwomen examined in a general gynecology clinic and in a colposcopy referral center fromOctober 2014 to October 2015. The colposcopy groupconsisted of 71women, and the general gynecologygroupconsisted of 55 women. Cervical samples were collected for cervical cytology and a multiplex realtime polymerase chain reaction (PCR) was developed to detect human papillomavirus (HPV) and the STIs caused by the following microorganisms: Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum, and Neisseria gonorrhoeae. A multivariate analysis was performed by logistic regression, considering the significance level of 0.05. Results The general frequency of STIs was: 46.8% (HPV); 27.8% (C. trachomatis); 28.6% (M. genitalium); 0.8% (M. hominis); 4.8% (U. urealyticum); and 4.8% (N. gonorrhoeae). The significant risk factors for CIN were: HPV infection (odds ratio [OR] = 2.53; p = 0.024); C. trachomatis (OR = 3.04; p = 0.009); M. genitalium (OR = 2.37; p = 0.04); and HPV and C. trachomatis coinfection (OR = 3.11; p = 0.023). After the multivariate analysis, a significant associationwas found betweenHPVand CIN(OR = 2.48; 95% confidence interval [95%CI]: 1.04-5.92; p = 0.04); and between C. trachomatis and CIN (OR = 2.69; 95%CI: 1.11-6.53; p = 0.028). Conclusion The frequency of STIs was high in asymptomatic patients. Infections by HPV and C. trachomatis were independently associated with the presence of CIN. The high frequency of STIs in asymptomatic women suggests the need for routine screening of these infections.

Resumo Objetivo Determinar a frequência de infecções sexualmente transmissíveis (ISTs) em mulheres assintomáticas e a associação destas infecções com a neoplasia intraepitelial cervical (NIC). Métodos Foi realizado um estudo transversal recrutando mulheres atendidas em uma clínica ginecológica geral e em um centro de referência para colposcopia, de outubro de 2014 a outubro de 2015. O grupo de colposcopia consistiu de 71 mulheres, e o grupo de ginecologia geral consistiu de 55 mulheres. Amostras cervicais foram coletadas para citologia cervical e uma reação em cadeia de polimerase (RCP) multiplex em tempo real para detecção do vírus do papiloma humano (HPV) e das ISTs provocadas pelos seguintes micro-organismos: Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum e Neisseria gonorrhoeae. Foi realizada uma análise multivariada por regressão logística, considerando-se o nível de significância de 0,05. Resultados A frequência geral de ISTs foi: 46,8% (HPV); 27,8% (C. trachomatis); 28,6% (M. genitalium); 0,8% (M. hominis); 4,8% (U. urealyticum); e 4,8% (N. gonorrhoeae). Os fatores de risco significantes para NIC foram: infecção pelo HPV (razão de probabilidades [RP] = 2,53; p = 0,024); C. trachomatis (RP = 3,04; p = 0,009); M. genitalium (RP = 2,37; p = 0,04); e coinfecção por HPV e C. trachomatis (RP = 3,11; p = 0,023). Após a análise multivariada, foi encontrada uma associação significante entre HPV e NIC (RP = 2.48; intervalo de confiança de 95% [IC95%]: 1,04-5,92; p = 0,04) e entre C. trachomatis e NIC (RP = 2,69; IC95%: 1,11-6,53; p = 0,028). Conclusões A frequência de ISTs foi alta em mulheres assintomáticas. Infecções por HPV e C. trachomatis foram independentemente associadas com a presença de NIC. A alta frequência de ISTs em mulheres assintomáticas sugere a necessidade de rastreamento rotineiro dessas infecções.

Evaluation of the p16 and Ki-67 Biomarkers as Predictors of the Recurrence of Premalignant Cervical Cancer Lesions after LEEP Conization / Avaliação dos biomarcadores p16 e Ki-67 como preditores de recidivas de lesões pré-cancerígenas do colo do útero após conização por cirurgia de alta frequência

Abstract Objective To evaluate the expressions of biomarkers p16 and Ki-67 in low-grade (LG) or high-grade (HG) lesions, and to relate them to risk factors and the recurrence of these lesions. Methods A retrospective case-control study of 86 patients with LG and HG lesions who underwent a loop electrosurgical excision procedure (LEEP) between 1999 and 2004. The control group was composed of 69 women with no recurrence, and the study group, of 17 patients with recurrence. All patients were followed-up over a two-year period after surgery, and screened every six months, including cytology and colposcopy. Biopsy samples collected from LEEP were submitted to immunohistochemical analysis for p16 and Ki-67. The statistical analysis was performed using the Statistical Package for the Social Sciences software (SPSS, IBM-SPSS, Inc., Chicago, IL, US), with a significant p < 0.05. Results The biomarkers p16 and Ki-67, separately or combined, showed no relation to recurrence on the total analysis. However, evaluating specifically HG lesions, the positive expression (2+ and 3 + ) of p16/Ki-67 was associated with recurrence (0.010). In addition, p16 isolated was also more expressive in HG lesions (2+ and 3 + , p= 0.018), but it was unrelated to recurrence. Conclusion Proteins p16 and Ki-67, both isolated and combined, are not reliable primary markers for the recurrence of cervical lesions in the majority of LG lesions. However, analyzing only the group with prior diagnosis of HG lesions, the expressions of p16 and of p16/Ki-67 were associated with recurrence, and they may be useful in monitoring these cases.

Resumo Objetivo Avaliar as positividades dos biomarcadores p16 e Ki-67 em lesões de baixo grau (BG) ou de alto grau (AG), e relacioná-las com os fatores de risco e com a recidiva dessas lesões. Métodos Estudo retrospectivo caso-controle, com 86 pacientes com lesões de BG e AG, submetidas à conização por cirurgia de alta frequência entre 1999 e 2004. O grupo de controle foi constituído de 69 mulheres sem recidivas, e o grupo de estudo, de 17 pacientes que recidivaram. Todas as pacientes foram acompanhadas durante dois anos após a cirurgia, com controle a cada seis meses, incluindo citologia e colposcopia. As peças provenientes de cirurgia de alta frequência (CAF) foram submetidas a imunohistoquímica para p16 e Ki-67. A análise estatística foi realizada com o programa Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, IBM-SPSS, Inc., Chicago, IL, EUA), com p significante quando < 0,05. Resultados Isoladamente ou em conjunto, p16 e Ki-67 não se relacionaram com as recidivas quando analisados na totalidade dos casos. Entretanto, avaliando especificamente as lesões de AG, a positividade (2+ e 3 + ) do conjunto p16/Ki-67 foi relacionada com recidiva (0,010). No mais, p16, isoladamente, foi também mais expresso nas lesões de AG (2+ e 3 + , p= 0,018), mas sem relação com recidiva. Conclusão Quando testadas na totalidade dos casos, as proteínas p16 e Ki-67, separadas ou em conjunto, se mostraram ineficientes como marcadores primários de recidiva de lesões precursoras. Entretanto, quando avaliadas somente no grupo diagnóstico prévio de lesão de AG, as expressões das proteínas p16 e p16/Ki-67 têm relação com a recidiva, e podem ser úteis no acompanhamento desses casos.

In vitro culture of ovine mammary gland cells expressing beta-lactoglobulin and beta-casein / Células da glândula mamária ovina cultivadas in vitro expressam beta-lactoglobulina e beta-caseina

The expression of milk proteins in vitro is essential to exploit the mammary gland cells as a biological model. Enzymatic tissue disaggregation has been widely used to establish mammary cell culture, but its effect in long-term ovine mammary cell culture is not completely elucidated. This study aimed at comparing mechanical/enzymatic and mechanical dissociation methods to establish ovine mammary cell culture. We compared cellular differentiation induced by lactating ewe serum or fetal bovine serum based on the gene expression levels of milk proteins (beta-lactoglobulin, alpha s1-casein, and betacasein). Mechanically dissociated cells were positive immunostaining for cytokeratin 8.13, such as mammary epithelial cells. These cells are responsible for milk protein expression and they are low immunostaining for vimentin, mesenchymal marker. Mechanical/enzymatic dissociation cells were positive for vimentin. The fastest cell growth (cell/hour) was observed in the mechanical dissociation group cultured with 10% fetal bovine serum medium. Mechanically and mechanically/enzymatically derived cells were able to express beta-casein and beta-lactoglobulin, but not alpha s1-casein. The relative expression of beta-lactoglobulin was not affected by the tissue dissociation method or culture media, beta-casein relative expression was down regulated in mechanically dissociated cells cultured in the presence of lactating ewe serum, (P = 0.019). Beta-casein relative expression was also down regulated in mechanically/enzymatically dissociated cells cultured with fetal bovine serum (P = 0.021). In the present conditions, we conclude that mechanical dissociation followed by culture with 10% of fetal bovine serum was the most efficient method to induce milk proteins' mRNA expression by ovine mammary epithelial cells in vitro.(AU)

A expressão in vitro de proteínas do leite é essencial para explorar as células da glândula mamária como um modelo biológico. A desagregação tecidual via enzimática é amplamente utilizada para o estabelecimento cultivo de células mamárias. No entanto, seu efeito a longo prazo no cultivo de células da glândula mamária ovina ainda não é bem elucidado. Este estudo tem como objetivo comparar dois métodos de dissociação tecidual, mecânico/enzimático e mecânico, para estabelecer cultivo celular de glândula mamária ovina. A indução da diferenciação celular, por adição de soro de ovelha lactante ou soro fetal bovino, foi avaliada pelos níveis de expressão de proteínas do leite (beta-lactoglobulina, alpha s1-caseína e beta-caseína). Células mecanicamente dissociadas foram positivamente marcadas para a presença de citoqueratina 8.13, marcador para células epiteliais mamárias. Essas células são as responsáveis pela produção das proteínas do leite e são pouco marcadas para a presença de vimentina, marcador para células de origem mesenquimal. Já as células obtidas da dissociação mecânica/ enzimática foram positivamente marcadas para presença de vimentina. A maior velocidade de crescimento (células/hora) foi observado para o grupo com dissociação mecânica cultivado em meio com 10% de soro fetal bovino. As células obtidas tanto da dissociação mecânica quanto mecânica/enzimática foram capazes de expressar beta-lactoglobulina e beta-caseína, mas não alfa s1-caseína. A expressão relativa de beta-lactoglobulina não foi afetada pelo método de dissociação ou meio de cultivo. A expressão relativa da beta-caseína foi negativamente regulada para células mecanicamente dissociadas e cultivadas na presença de soro de ovelha lactante (P = 0,019). A expressão relativa da beta-caseína também foi negativamente regulada para células dissociadas de forma mecânica/enzimática e cultivadas com soro fetal bovino (P = 0,021). Nas condições do presente estudo, concluímos que o método de dissociação mecânica seguido pelo cultivo em meio com 10% de soro fetal bovino foi o método mais eficiente para induzir a expressão mRNA de proteínas do leite por células epiteliais mamárias ovinas in vitro.(AU)

Ortotanásia: a percepção dos formandos de enfermagem quanto à temática. uma abordagem fenomenológica / Ortotanásia: the perception of the nursing trainees regarding the theme. a phenomenological approach

A graduação dá grande ênfase a formar profissionais de enfermagem para a manutenção da saúde e cura de doenças, formando uma visão curativista e dicotomizada do indivíduo, apesar de as diretrizes curriculares pautarem que esses devem ser profissionais com formação generalista, humanista, crítica e reflexiva. A ortotanásia ("morte correta") objetiva a não intervenção no desenvolvimento natural da morte quando essa é iminente e inevitável, ou seja, um cuidado para que o indivíduo encontre uma morte com o mínimo de sofrimento possível, garantindo sua dignidade. A pesquisa tem por objetivos: Desvelar qual é a percepção dos formandos de enfermagem quanto à sua formação acadêmica diante da temática ortotanásia; descrever a percepção dos formandos quanto à sua formação para vivenciar a prática de ortotanásia e o significado dessa para eles e desenvolver junto aos formandos de enfermagem, a partir de suas contribuições, um material didático e institucional voltado à formação e instrução de novos formandos sobre a temática. Trata-se de uma pesquisa fenomenológica qualitativa, realizada com acadêmicos do último ano da Escola de Enfermagem Aurora de Afonso Costa, após aprovação pelo Comitê de Ética sob o número 1.850.413. Foram realizadas 23 entrevistas fenomenológicas norteadas por um roteiro de perguntas abertas, cujos dados foram analisados à luz de Merleau-Ponty e tratados através da proposta metodológica de Amedeo Giorgi. Após a análise dos dados foram estruturados os grupos de conhecimento "Minha Formação Acadêmica" e "Cuidado com a Morte não com o Morrer", demonstrando que os acadêmicos têm a percepção de uma formação deficiente no que diz respeito à temática de ortotanásia e ao preparo para vivenciar o processo de morte, o que interfere na concepção quanto à prática de ortotanásia. A inclusão da temática de forma transversal durante o curso e a utilização de meios audiovisuais foram os principais apontamentos como possível produto para a abordagem acadêmica dessa temática. Perante tais dados percebe-se a necessidade com urgência de uma grande difusão sobre a temática de ortotanásia no meio acadêmico, assim como a preparação dos alunos de enfermagem para vivenciar o processo da finitude humana, sendo assim capazes de entender todas as suas fases e atuando em cada uma delas, respeitando as necessidades e a dignidade de seus pacientes de forma humana e capacitada. Foi estruturada, como produto desta pesquisa, uma aula sobre a temática da ortotanásia para aplicabilidade junto a grupos multiprofissionais da área de saúde, assim como um folder explicativo. Tais produtos já foram aplicados na forma prática junto a acadêmicos de enfermagem da Escola de Enfermagem Aurora de Afonso Costa e à equipe multiprofissional de um hospital público de Campos dos Goytacazes

Graduation places great emphasis on training nursing professionals to maintain health and cure diseases, forming a curative and dichotomized view of the individual, even though curricular guidelines indicate that they should be professionals with a generalist, humanistic, critical and reflective background. Orthothanasia ("normal death") aims at not intervening in the natural course of death when it is imminent and inevitable, meaning care for the individual to die with as little suffering as possible, ensuring their dignity. This research aims to: 1) unveil the perceptions of nursing graduates with regard to their academic training on orthothanasia; 2) describe the perceptions of trainees as to their training experience on the practice of orthothanasia and its meaning to them; and 3) based on their contributions, to develop with the nursing trainees didactic and institutional material aimed at the training and instruction of new trainees on this theme. This study represents qualitative phenomenological research carried out with final year scholars of the Aurora do Afonso Costa Nursing School, with the approval of its Ethics Committee (Nº. 1.850.413). Twenty-three phenomenological interviews were conducted involving a series of open questions, the responses to which were analyzed in accordance with Merleau-Ponty and the methodological approach of Amedeo Giorgi. After analyzing the data, the knowledge groups "My Academic Training" and "Beware of Death not Dying" were structured, which demonstrated that trainees have a perception of poor training regarding the topic of orthopathy and their preparation for experiencing the death process, which interferes with the concept of practicing orthothanasia. Inclusion of this theme transversally during courses and the use of audiovisual media were the principle suggestions for academically approaching this topic. In view of these data, greater diffusion of the topic of orthothanasia in the academic milieu is urgently needed, as is preparation of nursing trainees to experience the human death process, helping them to understand all its phases and how to act in each of them and to respect the needs and dignity of their patients in a humane and professional way. Arising from this research, a class on orthothanasia was conducted for multiprofessional groups in the health area and an explanatory folder was prepared. Such teaching aids have already been provided in practical form to nursing academics from the Aurora do Afonso Costa Nursing School and the multiprofessional team of a public hospital in Campos dos Goytacazes

Profile of patients with brain tumors and the role of nursing care / Perfil dos pacientes com tumores cerebrais e o papel do enfermeiro / Perfil de pacientes con tumores cerebrales y el papel de la enfermería

ABSTRACT Objective: to describe the profile of 200 patients with central nervous system tumors (CNST), and the role of the nursing care. Method: prospective, quantitative and descriptive analysis of medical records of 200 patients with TSNC. Results: a total of 61% of our patients had benign CNST and 39% had malignant tumors. The extent of patient dependence, according to the Karnofsky Performance Status scale, was significantly greater for patients with malignant CNST (p < .05), indicating that these patients needed more support with their activities of daily living. Conclusion: patients with CNST need specialized care, with specific guidance regarding their disease and aspects of daily living after treatment. Thus, the nurse can function as a key element for the effectiveness of care provided to patients and family members with the aim of enhancing the quality of life of all those affected, directly or indirectly, by the disease.

RESUMO Objetivo: descrever o perfil de 200 pacientes com tumores no sistema nervoso central (TSNC) e o papel do cuidado em enfermagem. Método: análise prospectiva, quantitativa e descritiva de prontuários de 200 pacientes com TSNC. Resultados: 61% dos pacientes possuíam TSNC benignos e 39% tumores malignos. O grau de dependência do paciente de acordo com a Escala de Karnofsky foi significativamente maior para pacientes com tumores malignos (P <0,05), indicando que estes precisam de maior esforço e, consequentemente, apoio em suas atividades diárias. Conclusão: Pacientes com TSNC necessitam de cuidados especializados, com orientações específicas a respeito de sua doença e aos aspectos da sua vida diária após o tratamento. Assim, o enfermeiro pode ser um elemento-chave para a eficácia dos cuidados prestados aos pacientes e familiares com o objetivo de melhorar a qualidade de vida de todas as pessoas afetadas, direta ou indiretamente, pela doença.

RESUMEN Objetivo: describir el perfil de los 200 pacientes con tumores del sistema nervioso central (TSNC) y el papel de la enfermería. Método: análisis prospectivo, cuantitativo y descriptivo de los registros médicos de 200 pacientes con TSNC. Resultados: 61% de los pacientes tenían TSNC benignos y 39% tumores malignos. El grado de la dependencia de los pacientes según la Escala de Karnofsky fue significativamente mayor en los pacientes con tumores malignos (P <0,05), lo que indica que estos pacientes necesitan más apoyo en las actividades diarias. Conclusión: los pacientes con tumores cerebrales requieren atención especializada, con directrices específicas sobre su enfermedad y aspectos de la vida diaria después del tratamiento. Por lo tanto, los enfermeros pueden ser un elemento clave para la eficacia de la atención prestada a los pacientes y sus familias con el objetivo de mejorar la calidad de vida de las personas afectadas por la enfermedad.

Desequilíbrio hormonal e disfunção menstrual em atletas de ginástica rítmica / Hormonal imbalances and menstrual dysfunction in high-performance rhythmic gymnastics / Desequilibrio hormonal y la disfunción menstrual en atletas de gimnasia rítmica

ResumoObjetivou-se avaliar a magnitude das alterações de hormônios reguladores do ciclo menstrual (CM) e testosterona de atletas de ginástica rítmica (GR) de alto rendimento, em período pré-competitivo para a Olimpíada de Beijing. Foram realizadas coletas de sangue em 4 momentos, com intervalos de 7 dias. Os hormônios estrogênio, progesterona, luteinizante (LH), folículo estimulante (FSH) e testosterona foram mensurados por quimioluminescência. As atletas (n = 7) relataram disfunção menstrual e houve expressiva variação hormonal intra e entre indivíduos. Das amostras de estrogênio, 65% ficaram abaixo do valor referencial clínico, enquanto que as concentrações de progesterona e LH ficaram próximas ao limite inferior. Para FSH e testosterona, 10% e 30% das amostras, respectivamente, ficaram abaixo do referencial. Conclui-se que atletas de alto rendimento em GR apresentam maior risco de desequilíbrio hormonal e disfunção menstrual, o que inspira necessidade de atenção clínica.

AbstractThis study aimed to evaluate the behavior and magnitude of alteration of hormones that regulate menstrual cycle (MC) and testosterone from Olympic-level Rhythmic Gymnastics (RG). It was studied a population of Olympic-level athletes of RG in pre-competitive period to the Beijing Olympic Games. Blood samples were taken at four opportunities, of seven in seven days. The chemiluminescence technical was used to analyze the estrogen, progesterone, luteinizing hormone (LH), follicle stimulating hormone (FSH) and testosterone. All athletes had menstrual dysfunction. There was high intra and interindividual hormonal variation. To the estrogen, 65% of the samples had results lower than reference ranges. The progesterone and LH concentrations were closed with the lower limit of the clinical reference, and 10% and 30% of the values to FSH and testosterone, respectively, were lower than reference. Thus, RG athletes show increased risk to hormonal imbalances and menstrual dysfunction that justify clinical care.

ResumenEl objetivo fue evaluar la magnitud de la variación de las hormonas que regulan el ciclo menstrual (MC) y la hormona testosterona en atletas de GR. Participaron del estudio una población de atletas de alto rendimiento en GR en el pre-competitivo para los Juegos Olímpicos de Beijing. Las muestras de sangre se recogieron en 4 periodos con un intervalo de 7 días. Se utilizó el análisis de quimioluminiscencia de las hormonas estrógeno, progesterona, hormona luteinizante (LH), hormona estimulante del folículo (FSH) y la testosterona. Todos los atletas tenían disfunción menstrual y hormonal, y variación significativa dentro y entre individuos. Además, las muestras de estrógeno, el 65% estaba por debajo del valor de referencia clínica. Las muestras de FSH y testosterona, 10% y 30%, respectivamente, estaban por debajo de los valores de referencia. Por lo tanto, los atletas RG muestran un aumento del riesgo de desequilibrios hormonales y disfunción menstrual que merecen la atención clínica.

Comparison of different methods for exogenous DNA uptake by bovine spermatozoa / Comparação de diferentes métodos de incorporação de DNA exógeno pelo espermatozoide bovino

Although genetic manipulation of farm animals is of great interest for animal production and the pharmaceutical industry, its efficiency remains far from satisfactory. Pronuclear injection, which is the most widely used technique for such modification, mainly in mice, remains limited for this species. Some alternatives have been developed such as sperm mediated gene transfer, in which the spermatozoa are used as vectors for DNA delivery during in vitro fertilization. Mature sperm cells are able to spontaneously bind exogenous DNA molecules which may be internalized into sperm nuclei. Given the potential of sperm mediated gene transfer for livestock animals transgenesis, the aim of this study was to evaluate four methods of DNA uptake for sperm mediated gene transfer in bovine: incubation with DNA, plasma membrane alteration induced by calcium ionophore followed by incubation with DNA, electroporation and lipofection. Spermatozoa not exposed to exogenous DNA were used as control group. Cleavage, blastocyst and hatching rates were recorded at 72 hours post insemination (hpi), days 9 and 12 of embryo culture, respectively. Exogenous DNA-positive embryos were evaluated by PCR. No effect of treatment was observed on cleavage, blastocyst and hatching rates. In addition, percentage of DNA positive blastocysts did not differ among experimental groups. In spite of the low number of positive embryos, our results show that all treatments presented similar efficiencies for DNA delivery during in vitro fertilization. In conclusion, although the development rates were similar and constant in all groups, other factors such as exogenous DNA sequence, size and concentration should be considered to improve sperm mediated gene transfer.

Apesar da manipulação genética de animais domésticos ser de grande interesse para a produção animal e para a indústria farmacêutica, a sua eficiência ainda é insatisfatória. A injeção pronuclear, a técnica mais utilizada para tal propósito, principalmente em camundongos, ainda apresenta limitações para esta espécie. Algumas alternativas têm sido desenvolvidas como o uso de espermatozoides como vetores para transferência gênica, na qual a célula espermática tem habilidade espontânea de se ligar à molécula de DNA e internalizá-la. Dado o potencial da transferência gênica mediada por espermatozoide para animais domésticos transgênicos, o objetivo do presente trabalho foi a avaliação de quatro métodos de incorporação de DNA para a transferência gênica mediada por espermatozoides na espécie bovina: incubação com DNA, alteração da membrana plasmática induzida por cálcio ionóforo seguida por incubação com o DNA exógeno, eletroporação e lipofecção. Espermatozoides não expostos ao DNA exógeno foram usados como grupo controle. Os índices de clivagem, blastocisto e eclosão foram avaliados, respectivamente, as 72 horas após a inseminação dos oócitos, bem como, aos 9 e 12 dias de cultivo embrionário. Os embriões positivos para o DNA exógeno foram avaliados por PCR. Nenhum efeito de tratamento foi observado nos índices de clivagem, blastocisto e eclosão. Além disso, a porcentagem de blastocistos positivos para o DNA exógeno não diferiu entre os grupos experimentais. Apesar do baixo número de embriões positivos para DNA exógeno, os resultados obtidos mostram que todos os tratamentos apresentaram eficiências similares. A conclusão obtida foi que, apesar de os índices de desenvolvimento embrionário terem sido similares e constante em todos os grupos experimentais, outros fatores como a sequência, o tamanho e a concentração do DNA exógeno devem ser avaliados para melhorar a transferência gênica mediada por espermatozoides.

Gene expression profile of Protamines and Transition Nuclear Proteins in bovine testis / Expressão gênica de protaminas e proteínas nucleares de transição em testículos bovinos

Protamines (PRM) are the major DNA-binding proteins in the sperms nucleus and can pack the DNA into than 5% of the volume of a somatic cell nucleus. It is already know that bulls only have the PRM1 protein on mature spermatozoa while most mammals also have the PRM2. Transition nuclear proteins (Tnps) and PRMs are fundamental to DNA integrity. It has already been reported the influence of PRM on chromatin structures, generating low fertility. However, molecular mechanisms underlying these effects are not known. The relative expression of PRM1, PRM2, PRM3, Tnp1 and Tnp2 was determined by real time RT-PCR, using bovine specific primers and β-actin as endogenous control. Quantification of mRNA relative expression showed a higher expression of PRM1 compared to the other genes. The PRM3 mRNA had the lowest relative expression. A significant (p < 0.05) and positive correlation was found between PRM1 and PRM2 (r = 0.518), PRM2 and Tnp1 (r = 0.750), PRM2 and Tnp2 (r = 0.706), PRM3 and Tnp1 (r = 0.542), PRM3 and Tnp2 (r = 0.731) and between Tnp1 and Tnp2 (r = 0.820). Since most of the knowledge about protamine 2 in bovine is based on a work from 1990 and according to new studies we know that PRM1 and PRM2 are important to bull fertility, more research is needed to elucidate the real function of protamines on bovines.

Protaminas (PRM) são as principais proteinas ligantes do DNA espermático e podem compactar o núcleo do espermatozóides em menos de 5% do volume de uma célula somática. Ká se sabe que o touro produz apenas a PRM1 em espermatozoide maduro, enquanto a maioria dos mamíferos também produz a PRM2. As proteínas nucleares de transição (Tnps) e as PRMs são fundamentais para a integridade do DNA. Já foi descrita a influência das protaminas na estrutura da cromatina e a associação destas com a fertilidade. Entretanto, os mecanismos moleculares que geram mudanças na cromatina espermática são desconhecidos. A expressão relativa da PRM1, PRM2, Tnp1 e Tnp2 foi determinada para dez testículos de touros oriundos de matadouros comerciais, utilizando a técnica de RT-PCR em tempo real, com primers específicos para bovinos e a B-actina como controle endogeno. Ao quantificar a expressão relativa do RNAm, detectou-se alta expressão relativa da PRM1, em comparação aos outros genes. A expressão relativa da PRM3 foi a menor de todos os genes. Foram encontradas correlações positivas e significantes (p < 0,05) entre PRM1 e PRM2 (r = 0,518), PRM2 e Tnp1 (r = 0,750), PRM2 e Tnp2 (r = 0,706), PRM3 e Tnp1 (r = 0,542), PRM3 e Tnp2 (r = 0,731) e entre Tnp1 e Tnp2 (r = 0,820). Visto que a maioria dos conhecimentos sobre a PRM2 estão baseados em um trabalho de 1990 e, de acordo com recentes estudos se sabe que a PRM1 e a PRM2 são importantes para a fertilidade do touro, mais estudos são necessários para determinar a real função das protaminas em touros.

Concentração de açúcares presentes em alimentos infantis industrializados consumidos por crianças de Manaus-AM / Concentration of sugars in industrialized children's foods consumed by children of Manaus-AM

Objetivo: Determinar a concentração de açúcares presente em alimentos infantis industrializados consumidos por crianças da cidade de Manaus (AM). Método: Selecionaram-se aleatoriamente seis tipos de alimentos infantis industrializados, em triplicata, com lotes diferentes, os quais foram comprados em supermercados de Manaus e divididos em três grupos: Grupo 1- Bebidas; Grupo 2- Papinhas de Frutas para Bebês e Grupo 3 - Bolachas doces. Determinou-se, pelo método de Lane-Eynon, a concentração de açúcares redutores em glicose e os não redutores em sacarose dos mesmos. As concentrações de açúcares encontradas foram comparadas às contidas nos rótulos dos produtos analisados. Na análise dos dados foi utilizada a Análise de Variância (ANOVA) e na comparação das médias em relação aos diferentes produtos foi aplicado o teste estatístico de Tukey, com nível de significância de 5%. Resultados: Constatou-se diferença estatisticamente significante na comparação da média do percentual de açúcar redutor em glicose em relação aos diferentes produtos (ANOVA - p menor que 0,001). Na comparação dois a dois, pelo teste de Tukey, a papinha de fruta de maçã (34,22%) e de pera (22,34%) apresentaram as maiores médias de açúcares redutores em glicose (p= 0,03), enquanto o biscoito Bono sabor chocolate (52,83%) e o bolinho de baunilha com recheio artificial de chocolate (39,34%) apresentaram as maiores médias de sacarose (p=0,02). Conclusão: Altas concentrações de açúcares, superiores às especificadas na embalagem, foram encontradas na maioria dos alimentos infantis industrializados investigados, expondo crianças desde a mais tenra idade a um desafio cariogênico significativo.

Objective: To determine the concentration of sugars in industrialized children's foods consumed by children living in the city of Manaus-AM. Method: Six types of industrialized children's foods were selected, in triplicate, with different lots, which were purchased at supermarkets of Manaus, and divided into three groups: Group 1- beverages; Group 2- baby fruit paps; and Group 3 - Sweet cookies. The Lane-Eynon method was used to determine the concentration of reducing sugars in glucose and non-reducing sugars in sucrose of the foods. The concentrations of sugars were compared with those contained in the product labels. Analysis of variance (ANOVA) was used for the analysis of data and the Tukey's test was used for comparison of the means in relation to the different products. The significance level was set at 5%. Results: There was statistically significant difference in the comparison of the percent mean of reducing sugars in glucose for the different products (ANOVA; p less than 0.001). Two-by-two comparisons by the Tukey's test showed that apple (34.22%) and pear (22.34%) baby paps presented the highest means of reducing sugars in glucose (p=0.03), while "Bono" chocolate cookie (52.83%) and vanilla muffin with artificial chocolate stuffing (39.34%) presented the highest means of sucrose (p=0.02). Conclusion: High concentrations of sugars, superior to those indicated in the labels, were found in most industrialized children's foods evaluated in this study, exposing children at very early age to a remarkable cariogenic challenge.

Educação Física e esportes na Ação Integralista Brasileira: Hollanda Loyola e a educação do corpo / Educación Física y deporte en Acción Integralista Brasileña: Hollanda Loyola y educación del cuerpo / Physical Education and sports in Ação Integralista Brasileira: Hollanda Loyola and body education

Investiga como a Ação Integralista Brasileira, movimento social que emerge no Brasil Republicano, educava corporalmente, por meio da Educação Física e dos esportes, membros inscritos em suas fileiras. Analisa artigos publicados em A Offensiva, jornal doutrinário e prescritivo do movimento, publicados de 17/05/1934 a 19/03/1938, com destaque para os artigos de Francisco de Assis Hollanda Loyola. Os escritos de Loyola, Mestre de Campo da Milícia e diretor da Escola de Instructores de Educação Physica integralista, ganham destaque porque instituíram um modo inovador de conceber a prática esportiva e o treinamento físico na AIB. Loyola conquistou espaço no jornal e traçou o "Plano Geral" de Educação Física voltado para as necessidades e características do povo brasileiro, aspecto enfatizado pelo autor. Concluiu que agregando as prescrições de Loyola a práticas ritualistas e simbólicas, o integralismo impunha ao corpo um modo muito próprio de ser integralista, modo de ser um "soldado-integral".

TIt investigates how Ação Integralista Brasileira, a social movement that emerged in Republican Brazil, educated physically, through of Physical Education and sports, members enrolled in its ranks. It examines articles published in A Offensiva, prescriptive and doctrinaire newspaper of the movement, published from 17/05/1934 to 19/03/1938, with emphasis on Francisco de Assis Hollanda Loyola's articles. Loyola was Master of the Militia Field and director of the integralist Physical Education School of Instructors, and his writings are highlighted because they have established an innovative way to conceive the sports and physical training at AIB. Loyola won space in the newspaper and traced "General Plan" of Physical Education focused on Brazilian people's needs and characteristics, an aspect emphasized by the author. The study concluded that adding Loyola's requirements to ritualistic and symbolic practices, the 'integralismo' imposed on the body a way of being integralist, way of being an "integral soldier".

Investiga cómo la Acción Integralista Brasileña, movimiento social que surgió en el Brasil Republicano, había educado el cuerpo, a través de la Educación Física y los deportes, de los miembros inscriptos en sus filas. Analiza los artículos publicados en A Offensiva, periódico doctrinario y prescriptivo del movimiento, publicado de 17/05/1934 al 19/03/1938, con énfasis en los artículos de Francisco de Assis Hollanda Loyola. Los escritos de Loyola, Jefe de Campo de la Milicia y director de la Escuela de Instructores de Educación Física integralista, se destacan porque han establecido una forma innovadora de concebir el deporte y el entrenamiento físico en la AIB. Loyola ganó espacio en el periódico y trazó el "Plan General" de Educación Física centrado en las necesidades y características del pueblo brasileño, aspecto subrayado por el autor. Se concluyó que al agregar las directrices de Loyola a las prácticas rituales y simbólicas, el integralismo tenía impuesto sobre el cuerpo una manera muy propia de ser integralista, manera de ser un "soldado-integral".

A educação do corpo para o "soldado integral", "forte de físico, culto de cérebro e grande de alma" / The education of the body for an "integral soldier", "physically strong, intelligent and soul superior"

Este estudo reflete sobre o treinamento paramilitar realizado pela Milícia Integralista, unidade armada da Ação Integralista Brasileira (AIB), principal partido de extrema direita no Brasil da década de 1930, no sentido de formar o "soldado integral", "forte de físico, culto de cérebro e grande de alma". Analisa os números do jornal Monitor Integralista, periódico doutrinário e prescritivo do movimento, encontrado no Arquivo Público e Histórico do Município de Rio Claro, SP, e o jornal A Offensiva, que se encontra microfilmado na Biblioteca Nacional no Rio de Janeiro. Concluiu que o objetivo de Plínio Salgado, Chefe Nacional da AIB, era treinar verbalmente, por meio de discursos, de propaganda boca a boca e pelo voto, ou corporalmente, pela luta armada e corporal, os integralistas para torná-los aptos a defender as causas do movimento.

This study examines the paramilitary training carried out by the Integralist Militia (Milícia Integralista), unit of the Brazilian Integralist Action (Ação Integralista Brasileira, AIB) of the extreme right wing political party in Brazil in the 1930s. The training was aimed to create the "integral soldier", a "physically strong, intelligent and soul superior" one. The study analyzes issues of the newspaper "Monitor Integralista", a prescriptive and dogmatic journal of the movement, found in the Public and History Archives of the city of Rio Claro, State of São Paulo, and in the "A Offensiva" newspaper, microfilmed an archived at the National Library of Rio de Janeiro. It concludes that Plínio Salgado's goal, the National Head of the AIB, was to train, by using verbal persuasion, speeches, word of mouth and by vote, by force and physical combat, the integralists to defend the causes of the movement.

Mulheres integralistas: enfermeiras "blusas-verdes" a serviço da nação / Holistic women: "green blouse" nurses to the service of the nation / La mujer integral: enfermeras "blusas-verdes" en el servicio de la nación

O estudo objetiva investigar a atuação designada à enfermeira integralista e a instrução que recebia para desempenhar com a máxima eficácia o seu papel nos quadros da Ação Integralista Brasileira, partido político de extrema direita, que emerge no Brasil, na década de 1930. Utiliza como fonte documental jornais integralistas, a coleção "Enciclopédia Integralista" e os prontuários sobre a Escola de Enfermagem Integralista que compõem o acervo criminal da Polícia Política, organizado pela Delegacia Especial de Segurança Política e Social. Como resultado, a pesquisa apresenta um expressivo investimento do integralismo na formação de enfermeiras, mulheres que aproveitaram o ensejo do momento para ampliar seus espaços sociais. Conclui que, embora o integralismo reforçasse os papéis descritos socialmente como femininos, a relação das mulheres com o movimento foi inovadora, pois possibilitou novas práticas e representações que elas passaram também a desenvolver na esfera pública, à exemplo, a atuação como enfermeiras.

This study aims to investigate the role assigned to the holistic nurse and the education she receives to perform her role with maximum efficiency within the Brazilian Holistic Action (Ação Integralista Brasileira), a right-wing political party that emerged in Brazil in the 1930s. It uses holistic newspapers, the "Holistic Encyclopedia" collection, and records about the Holistic School of Nursing which compose the criminal collection by the Political Police, organized by the Special Police of Political and Social Safety as source material. As a result, the study presents a significant investment of holistic thinking in formally educating nurses, women who took the opportunity of the moment to expand their social arenas. It concludes that, although holistic thinking strengthened social roles described as female, the women's relationship with the movement was innovative because it enabled new practices and representations that they also started to develop in the public sphere, for example, working as nurses.

El estudio pretende investigar la actuación designada a la enfermera integralista y la educación que recibió para llevar a cabo con la máxima eficacia su papel en las filas de la Ação Integralista Brasileira, partido político de extrema derecha que surgió en Brasil en la década de 1930. Utiliza como fuente material los periódicos del movimiento, la colección "Enciclopedia Integralista" y los registros sobre la Escuela de Enfermería Integralista que componen la colección penal de la Policía Política, organizado por la Policía Especial de Seguridad Política y Social. Como resultado, el estudio presenta una importante inversión del integralismo en la formación de enfermeras, mujeres que aprovecharon la oportunidad del momento para ampliar sus espacios sociales. Se concluye que, a pesar del integralismo fortalecer los roles sociales descriptos como femeninos, la relación de mujeres con el movimiento fue innovadora, ya que permitió nuevas prácticas y representaciones que ellas comenzaron también a desarrollar en el ámbito público, como ejemplo, la representación como enfermeras.

Efeitos embriotóxicos do veneno de serpentes Crotalus durissus terrificus / Embriotoxic effects of Crotalus durissus terrificus snake venom

Introdução - A atividade neurotóxica, miotóxica e coagulante do veneno das serpentes Crotalus durissus terrificus (VCdt) são responsáveis pelas altas taxas de mortalidade observada em acidentes envolvendo estas serpentes. Estes acidentes, quando ocorrem na gravidez, podem levar ao aborto devido à interferência com a homeostasia materna e/ou à embrioletalidade, por efeito direto do veneno. Materiais e Métodos - Este trabalho estudou os efeitos tóxicos do VCdt, administrado nas doses de 75 mg/kg ou 200 mg/kg por via subcutânea em camundongas no terceiro dia da sua gestação (período de pré-implantação). O grupo controle foi tratado da mesma forma que os experimentais, porém com solução salina. No último dia da gestação as fêmeas foram submetidas a eutanásia e observadas as possíveis malformações ósseas e viscerais de sua prole. Resultados e Conclusão - Os resultados mostraram que a administração da menor dose do VCdt não causou alterações significantes no desenvolvimento ósseo e visceral dos animais. No entanto, quando expostos a maior dose este promoveu aumento significante das anomalias e malformações, sugerindo que o envenenamento com esta dose no período inicial da gestação altera o desenvolvimento normal da prole de camundongos.

Introduction - The neurotoxic, myotoxic and coagulant activities of Crotalus durissus terrificus snake venom (VCdt) are responsible for the mortality rates observed in accidents involving the rattlesnake. Accidents during women pregnancy are a challenge, since animal venoms could led to pregnancy interruption as a consequence of maternal homeostasis disorder and/or a direct embryotoxic effect of the venom. Materials and Methods - In order to evaluate the possible embryotoxic effects of VCdt, doses of 75 mg/kg or 200 mg/kg of the venom were administered by subcutaneous route at day 3 of mice pregnancy (preimplantation period). The control group received saline in the same volume and during the same period as their respective experimental groups. The animals were submitted to euthanasia at term. Results and Conclusion - The treatment of the females during the preimplantation period did not cause significant changes in fetuses development, but the higher dose of the venom increased the number of anomalies or malformations of the fetuses.These results suggest that the VCdt in the higher dose (200 mg/kg) altered the normal development of the concept after implantation.

Absolute quantification of gene E7 in cervical samples of women infected by HPV using real time PCR

Objective: High grade oncogenic types of human papillomavirus (HPV), especially HPV16 and HPV18, possess a gene called E7, which acts on genes that regulate cell growth, promoting development of pre-neoplastic lesions that can lead to invasive carcinomas. The absolute quantification of this gene in cervical samples of HPV-infected women may contribute for better understanding the evolution of these lesions induced by the virus. Methods: We collected 60 cervicovaginal smears of women infected by HPV with or without uterine cervical squamous intraepithelial lesion, SIL) and 10 samples of women with no HPV infection or SIL. The absolute quantification of gene E7 was performed by Realtime PCR using specific primers and probes. Results: Samples infected by HPV16 have a higher number of gene E7 copies when compared to samples infected by HPV18. In the HPV18 group it was observed that those obtained from patients with low or high grade squamous intraepithelial lesions (HSIL) or invasive cervical cancer presented significantly higher concentrations of gene E7 when compared to patients with no cervical lesions. The number of gene E7 copies was higher in the group infected by HPV16 than by HPV18. In spite of that, there was no difference in the number of gene E7 copies in samples infected by HPV16 with or without SIL. Conclusions: Among the samples with HPV18, the number of copies of gene E7 was higher in the group with cervical lesions, and no differences were found for SIL, HSIL or invasive cancer patients.

Criopreservação e desenvolvimento in vitro de embriões bovinos / Cryopreservation and in vitro survival of bovine embryos

O objetivo deste trabalho foi estudar a remoção do crioprotetor, em duas ou três etapas, em embriões bovinos produzidos in vitro após a congelação em vapor de Nirtogênio. Blastocistos expandidos (1329) foram mantidos em co-cultivo (controle) ou criopreservados em 3 protocolos de congelação em vapor de nitrogênio. Os embriões foram equilibrados na solução de 10% de EG por 10 minutos e em 17%, 22% ou 28% de EG por 30 segundos. Após o envase, as palhetas foram mantidas em vapor de nitrogênio por 2 minutos e armazenadas em nitrogênio líquido. Após a descongelação, os crioprotetores foram diluídos em duas etapas, usando 0,3M de sacarose e solução isotônica ou em três etapas usando 0,3M de sacarose + 10% de EG; 0,3M de sacarose e solução isotônica. Os embriões foram co-cultivados com células da granulosa, avaliando as taxas de re-expansão após 24 horas e de eclosão após 24, 48, 72 e 96 horas. Para os grupos congelados no vapor e diluição do crioprotetor em duas etapas, as taxas de eclosão foram de 1,94; 11,88 e 6,06% para EG17, EG 22 e EG 28 respectivamente. Já para os grupos com diluição do crioprotetor em três etapas, as taxas de eclosão foram de 4,67; 9,90 e 10,78% para EG17, EG22 e EG28 respectivamente.

The aim of this study was to evaluate the dilution of cryoprotectant in 2 or steps of bovine in vitro-produced embryos after quick-freezing. A total of 1329 expanded blastocyst were kept in co-culture as control group or cryopreserved by 3 quick-freezing protocols. The embryos were exposed to 10% EG for 10 minutes then to 17%, 22% or 28% for 30 seconds. After loading, the straws were held in nitrogen vapor for 2 minutes and then plunged and stored in liquid nitrogen. After warming, cryoprotectants were diluted in two steps using 0.3 M sucrose and isotonic solution, or three steps using 0.3 M sucrose + 10% EG then 0.3 M sucrose and isotonic solution. Embryos were co-cultured on a granulosa cell monolayer and evaluated after 24 hours for re-expansion and at 24, 48, 72 and 96 hours of co-culture for hatching rates. The in vitro survival rates of embryos cryopreserved by the quick-freezing method and two-step cryoprotectant dilution were 1.94; 11.88 and 6.06%, for EG17, EG22 and EG28 groups, respectively. At the three step dilution, the in vitro survival rates were 4.67; 9.90 and 10.78% for EG17, EG22 and EG28 groups, respectively.

Influência da infecção pelo HIV-1 sobre a presença do HPV em lesões do colo uterino / Influence of HIV-1 infection on the presence of HPV in uterine cervix lesions

Analisa a influência da infecção pelo HIV-1 sobre a presença e persistência da infecção pelos HPV16 e HPV18 em mulheres apresentando NIC

Influência do HPV-16 sobre a produção intralesional de IL-10 em mulheres imunogeneticamente responsivas e portadoras do HIV-1 / Influence of the HPV-16 on IL-10 intralesional production in immunogenetically responsive women carrying HIV-1 infection

A infecção pelo papilomavirus humano do tipo 16 - HPV 16, constitui importante fator de risco para o desenvolvimento do câncer cervical. Citocinas são importantes na resposta imune contra infecções virais. Geneticamente determinadas, podem apresentar predomínio para padrão associado com a eliminação do HPV, ou associadas com a persistência da infecção e progressão para lesões cervicais, como a interleucina 10. Além disso, a infecção pelo vírus da imunodeficiência humana do tipo 1, parece ser uma co-morbidade para o desenvolvimento das lesões cervicais